定位精确、穿刺针理想及操作熟练是肾穿刺活检成功的三要素。
    （１） 病人取俯卧位，腹下垫以枕头，以便将肾脏顶向背侧。
    （２） 确定穿刺点位置，可参考背部体表解剖标志经验定位，也可做静脉肾盂造影在X光电视荧光屏下直视定位，但目前最常用的仍为B型超声波定位。需确保肾脏穿刺点在肾下极。
    （３） 逐层局部麻醉，消毒、铺手术单，并逐层局麻至深层软组织。
    （４） 探针试穿，用9cm长腰穿针经皮肤逐层刺入，并在屏气后刺入肾周脂肪囊直达肾被膜（过脂肪囊壁有穿透感，达肾被膜时能有顶触感，此时针应随呼吸同步运动），记下针刺深度，拔针。
    （５） 穿刺取出肾组织标本：将穿刺针刺入，并参考腰穿针所测深度，屏气后刺入脂肪囊达肾被膜，核实穿刺针确随呼吸同步运动后，再令患者屏气，将针刺入肾脏完成取材操作。若用B超穿刺探头导针直视穿刺进，用探针测深度及观察穿刺针随呼吸摆动的步骤皆从略。
    （６） 标本取出后应及时由在穿刺现场的病理技术员用放大镜、解剖显微镜检查标本上有无肾小球，若无肾小球时应重复取材。肾组织应分别送光镜、电镜及免疫病理检查。