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尿蛋白定性易受尿量影响,而且在尿蛋白较多的情况下,尿蛋白定性无法真正反映尿蛋白量的变化,每100毫升尿中含0.5克和1.5克蛋白质时,尿蛋白定性为++++,无法判断其量的差别。定性简单、方便但不精确。24小时尿蛋白定量可较准确地反映尿中蛋白排泄量。尿蛋白定量测定方法: (1) 化学、物理结合法:①Esbach法:用苦味酸使尿蛋白凝聚,自然沉降后测量沉淀体积,以计算尿蛋白含量。此法简单但准确性差,所得结果只有真正尿蛋白含量的一半或2倍之多。②称重法:虽比Esbach法准确但操作复杂,不适于临床应用。 (2) 化学法:①凯氏定氮法:以钨酸沉淀尿蛋白,分离沉淀,再用凯氏定氮法测定蛋白含量,本法比较准确,但必须先除去非蛋白含氮物质,才能使结果准确。但本法标本用量大、复杂、费时,故临床少用。②比色法:a.双缩脲法:优点是对白、球蛋白产生颜色反应相近,干扰物质少,且不受温度影响,未发现卟啉、抗生素、镇静剂、维生素、X线造影剂有干扰现象,故比较准确。但灵敏度低(0.01吸光度相当于166.7微克蛋白质),操作复杂。b.酚试剂法:测定白蛋白与球蛋白时所产生的颜色强度不一致准确性差于双缩脲法。c.丹宁酸法:操作麻烦,已改为氯化铁与丹宁酸蛋白沉淀反应显色,5分钟后比色,此法灵敏,干扰物质少。③浊度法:a.磺其水杨酸法:3%磺基水杨酸做沉淀剂,可沉淀白蛋白、球蛋白2.4倍之多,尚能与多肽发生作用。大剂量青霉素、X线造影剂、血管扩张剂等可造成假阳性反应,去污剂可使结果偏低。本法简便、迅速但准确性差,但其灵敏度与精确度大于三氯醋酸法。b.三氯醋酸法:干扰物质少于磺基水杨酸法。两种蛋白沉淀剂与蛋白所产生的浊度都受温度影响,温度低时浊度小,磺基水杨酸法对白蛋白在30℃时产生的浊度比10℃时可高达近2倍,等量纯白蛋白与纯球蛋白吸光度亦可相差近2倍。④染料结合法:丽春红蛋白结合法:灵敏,测得结果与凯氏定氮法相符,灵敏度为2毫克/100毫升。 上述这些方法中临床常用双缩脲法和三氯醋酸或磺基水杨酸法。 |